JOURNAL OF LIGHT INDUSTRY

CN 41-1437/TS  ISSN 2096-1553

重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究

杜少平,胡海艳,甘祥武,黄秀敏,叶俊豪

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杜少平, 胡海艳, 甘祥武, 等. 重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究[J]. 轻工学报, 2020, 35(4): 1-7. doi: 10.12187/2020.04.001
引用本文:杜少平, 胡海艳, 甘祥武, 等. 重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究[J]. 轻工学报, 2020, 35(4): 1-7.doi:10.12187/2020.04.001
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DU Shaoping, HU Haiyan, GAN Xiangwu, et al. Study on high-density fermentation of β-mannanase produced by constitutive Pichia pastoris[J]. Journal of Light Industry, 2020, 35(4): 1-7. doi: 10.12187/2020.04.001
Citation:DU Shaoping, HU Haiyan, GAN Xiangwu, et al. Study on high-density fermentation of β-mannanase produced by constitutive Pichia pastoris[J]. Journal of Light Industry, 2020, 35(4): 1-7.doi:10.12187/2020.04.001
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重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究

  • 广州市微生物研究所, 广东 广州 510663

    • 作者简介:杜少平(1974-),男,广东省丰顺县人,广州市微生物研究所高级工程师,主要研究方向为微生物技术与相关检测.;

  • 基金项目:广州市科技计划项目（201710010154）

  • 中图分类号:TS201.3

Study on high-density fermentation ofβ-mannanase produced by constitutivePichia pastoris

  • Guangzhou Institute of Microbiology, Guangzhou 510663, China

  • Received Date:2020-05-21

    CLC number:TS201.3

  • 摘要:通过摇瓶实验，对重组毕赤酵母X-33/pGAPZαA-Man26A-39发酵培养基的碳源、氮源进行筛选，并在50 L发酵罐中采用间歇流加策略，对其发酵条件进行调控，以实现重组毕赤酵母高密度发酵产 β-甘露聚糖酶.结果表明：葡萄糖为发酵培养基的最适碳源，其初始添加质量浓度为30 g/L；初始质量分数为6%的玉米浆作为发酵培养基的氮源较为适宜；在间歇补料发酵调控中，通过间歇流加体积分数为25%的氨水、质量分数为50%的葡萄糖溶液和质量分数为20%的玉米浆，可使发酵液pH值维持在5.0~5.5之间，且保证发酵培养基的碳源、氮源充足；发酵60 h时采取放罐措施，此时酶活力可达2 685.5 U/mL，菌体质量浓度达331.1 g/L， OD 600达302.8，实现了 β-甘露聚糖酶的高效表达.
    Abstract:The carbon and nitrogen sources of the constitutive Pichia pastorisX-33/pGAPZαA-Man26A-39 fermentation medium were optimized by shake flask experiment,and the fermentation conditions were regulated in a 50 L fermentor by using intermittent feeding strategy,in order to realize high-density fermentation of constitutive Pichia pastoristo produce β-mannanase.The results showed that glucose was the most suitable carbon source for fermentation medium,and its initial centration was 30 g/L;corn syrup was the most suitable nitrogen source,and its initial mass fraction was 6%;during the regulation of intermittent fed fermentation,the pH value of bacteria could be maintained between 5.0~5.5 by intermittent flow adding 25% ammonia hydroxide,50% glucose solution and 20% corn syrup,and make sure the carbon and nitrogen sources of the fermentation medium were sufficient;after 60 h fermentation,took measures to put the fermentater tank,at this time,the maximum enzyme activity was 2 685.5 U/mL,the mass concentration of bacteria reached 331.1 g/L,and the OD 600reached 302.8,which achieved the high expression of β-mannanase.
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  • 收稿日期:2020-05-21
    通讯作者:陈斌, bchen63@163.com
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      沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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    杜少平, 胡海艳, 甘祥武, 等. 重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究[J]. 轻工学报, 2020, 35(4): 1-7. doi: 10.12187/2020.04.001
    引用本文:杜少平, 胡海艳, 甘祥武, 等. 重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究[J]. 轻工学报, 2020, 35(4): 1-7.doi:10.12187/2020.04.001
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    DU Shaoping, HU Haiyan, GAN Xiangwu, et al. Study on high-density fermentation of β-mannanase produced by constitutive Pichia pastoris[J]. Journal of Light Industry, 2020, 35(4): 1-7. doi: 10.12187/2020.04.001
    Citation:DU Shaoping, HU Haiyan, GAN Xiangwu, et al. Study on high-density fermentation of β-mannanase produced by constitutive Pichia pastoris[J]. Journal of Light Industry, 2020, 35(4): 1-7.doi:10.12187/2020.04.001
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    重组毕赤酵母产β-甘露聚糖酶的高密度发酵研究

      作者简介:杜少平(1974-),男,广东省丰顺县人,广州市微生物研究所高级工程师,主要研究方向为微生物技术与相关检测.
    • 广州市微生物研究所, 广东 广州 510663
    • 收稿日期: 2020-05-21
    基金项目:广州市科技计划项目（201710010154）

    摘要:通过摇瓶实验，对重组毕赤酵母X-33/pGAPZαA-Man26A-39发酵培养基的碳源、氮源进行筛选，并在50 L发酵罐中采用间歇流加策略，对其发酵条件进行调控，以实现重组毕赤酵母高密度发酵产β-甘露聚糖酶.结果表明：葡萄糖为发酵培养基的最适碳源，其初始添加质量浓度为30 g/L；初始质量分数为6%的玉米浆作为发酵培养基的氮源较为适宜；在间歇补料发酵调控中，通过间歇流加体积分数为25%的氨水、质量分数为50%的葡萄糖溶液和质量分数为20%的玉米浆，可使发酵液pH值维持在5.0~5.5之间，且保证发酵培养基的碳源、氮源充足；发酵60 h时采取放罐措施，此时酶活力可达2 685.5 U/mL，菌体质量浓度达331.1 g/L，OD600达302.8，实现了β-甘露聚糖酶的高效表达.

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